1. 细胞计数的意义
计数细胞是了解细胞数量变化的基本方法,细胞数量变化是细胞生理功能表现的重要指标,准确的细胞数量变化提供准确的功能信息,错误的细胞数量变化提供错误的功能信息。所以细胞计数准确性决定细胞生理学研究的成功与失败。
2. 细胞计数要解决的问题
细胞计数的目的是确定细胞样本中的细胞数量,一般是指单位体积内的细胞数量,如1升血样本中含有多少个红细胞,多少个白细胞;细胞学实验经常需要比较细胞处理前后的数量变化。计数细胞就是确定细胞样本处理前后每单位样本中含有多少个细胞,即单位体积内的细胞数。
3. 现行细胞计数仪器和计数方法存在的问题
现在计数细胞的仪器和方法不少,但计数准确度都不高,达不到细胞学研究要求的水平。原因出在细胞计数仪设计师对细胞计数的目的要求和细胞计数操作过程,认识不够清楚,设计的仪器结构原理有问题。以细胞计数板为例,细胞计数板的结构不太合理。细胞计数板的结构是在一片玻璃板上蚀刻出一个细胞计数池,呈方形,边长1mm,深度0.1mm,容积是0.1mm3=0.1微升=万分之一毫升,底面用线分割成方格。计数板计数的细胞数准确度没有问题,刻蚀的容积也没有问题,问题出在使用方法。细胞计数的时候,计数池上面加了一个盖玻片,细胞样本是从计数板与盖玻片之间的缝隙中加进去的。细胞液充满计数池和计数池与盖玻片之间的空隙,这个空隙中的细胞也进入计数池。因此计数的细胞体积应该是计数池的体积加上空隙体积。空隙体积是多大,不知道,计算细胞密度的时候都不计算内,被忽略掉了,所以细胞计数板计数的细胞密度不准确。缝隙体积很小,但相对于只有0.1微升的计数池体积,影响是很大的,可能达到15%或更大,所以是不可以忽略掉的。计数池容积太小和加盖玻片是细胞计数板的致命伤。
细胞计数板是最常用的细胞计数方法,优点是简单、方便,计数细胞真实,数量准确。缺点是计量体积不准确,计数结果不准确,另外计数的细胞无法回收使用和细胞数量少于10万的样本无法计数也是问题。
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4. 细胞计数问题解决办法
上面介绍的三种类型细胞计数方法,涵盖了现代生物医学领域细胞计数的基本技术和方法。细胞计数是要获得一个准确的细胞密度。细胞密度是单位体积内的细胞数量。计数细胞样本的体积准确,细胞数准确,密度才会准确。三种细胞计数方法,要么计数样本体积不准确(血球计数板,自动细胞计数仪),要么细胞计数不准确(流式细胞仪),所以细胞计数结果都不够准确。
计数细胞获得一个准确的细胞密度,看起来很复杂,难度很大,实际上真正理解了细胞计数的目的和要求,问题不难解决。欢迎来和飞迪生物详细了解细胞计数问题,一起交流,共同进步。13066324063