选择一款合适的PCR对于宠物的诊断尤为重要

　　以PCR技术为代表的分子诊断因其高灵敏性和高特异性等不可替代的优势，成为作为兽医实验室诊断的趋势和制高点。在临床工作中，PCR技术需要系统的培训和标准的操作流程，包括：样本前处理、核酸提取和纯化、PCR扩增和结果分析等

　　就样本处理方式而言有核酸免提取的、有化学裂解法手动核酸提取的、有离心柱法核酸提取的、有磁珠法核酸提取的；让兽医师们无从选择，到底应该怎样客观的看待这些，做到科学的选择呢，接下来会就PCR样本处理方式的不同方法做详细的阐述
　　
　　核酸提取和纯化是PCR检测的关键环节
　　
　　核酸提取是分子诊断实验十分重要的环节，因为首先必须把宠物样品中的核酸提取出来，才能进行后续的检测。
　　
　　核酸提取具有两大目的
　　
　　√  提纯（消除样本中干扰物质）
　　
　　√  浓缩（提高样本中核酸浓度）
　　

　　目前核酸提取和纯化的四种方式：

　　
　　PCR所检测样品（血清、全血、细胞保存液和粪便等）中有很多干扰物和抑制物，核酸含量低，直接检测核酸难度高，灵敏度差。因此检测之前，需要将样品中的核酸裂解，提纯并浓缩，也就是核酸提取。这是业界的主流做法。
　　
　　比如临床上一些鼻咽拭子和口腔拭子的洗脱液，成分很简单，可以不进行核酸提取，但如果不经过浓缩纯化，会降低检测的灵敏度。而复杂样本必须要进行核酸提取
　　
　　手动核酸提取操作繁琐并易导致样本被污染
　　
　　传统化学裂解法核酸提取
　　
　　所包含的沉淀和离心等操作，需要用到大量的生物样本，缺点是：
　　
　　√ 操作复杂、耗时长；
　　
　　√ 核酸收率低，易导致假阴性；
　　
　　√ 含化学有毒试剂
　　
　　离心柱法
　　
　　曾经应用很普及，较传统化学裂解法，离心柱法提高了核酸提取的效率，同时使用相对无毒的试剂，更为安全，但是
　　
　　√ 需要反复离心，不便于高通量、自动化操作
　　
　　√ 人工操作反复开盖加入或倒出试剂，易导致人为和气溶胶污染
　　
　　√ 相比磁珠法样本需求量大
　　
　　全自动封闭式磁珠法核酸提取是大势所趋
　　
　　为了适应现代分子生物学检测实验高通量、高敏感性、自动化操作的需要，运用磁珠自动提取核酸的方法应运而生了，该方法是纳米科技与生物技术的完美结合，具有其他核酸提取方法无法比拟的优势，主要体现在：
　　
　　√  核酸提取效率高：磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大；操作简单、用时短，可以在30min内完成。
　　
　　√ 全封闭自动化操作避免污染，确保结果稳定：能够实现封闭式和自动化操作，降低人工操作可能带来的人为和空气污染；磁珠提取核酸的方法采用智能化软件操作系统确保结果稳定性，避免人工操作引起的差异及错误。
　　

　　√  安全无毒：不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒溶剂，对实验操作人员没有伤害，符合现代以人为本，安全至上的理念。

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