您好,欢迎来到中国仪器批发网 | 免费注册

国产vs进口,荧光定量PCR预混液真实测评

来源:中国仪器批发网2019-11-18 15:07:23浏览:863
  实时荧光定量PCR(real-time qPCR)实验在分子生物学研究中越来越普遍。现在常用两种荧光定量方法:SYBR Green I嵌合荧光染料法,和TaqMan探针法。染料法成本较低,使用方便,是最常用的荧光定量方法;探针法成本较高,但是定量结果更准确。

  

朗基Q2000型荧光定量PCR系统(热线:13066324063)


  挑选一款质量好的扩增产品对于实验结果有至关重要的作用。新手们对于如何判断一款qPCR预混液的好坏有点迷茫,常常会出现一个误区:扩增效率越高越好。

  
  为什么不是效率越高越好?产物的特异性怎么判断?国产品牌和进口品牌的差距在哪里?通过下面的实验就可以看出来。
  
  测评开始

  5种品牌的TaqMan探针法荧光定量PCR预混液,同时用相同的模板DNA和引物进行扩增。扩增曲线如下:

  
  可以看出扩增曲线都正常,除了国产品牌C的Ct值较大,即扩增效率较低外,其余4个品牌的Ct值均接近。但是它们真实地反映了目标产物的实时扩增情况吗?
  
  我们对以上qPCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据产物大小可以直观地判断其特异性:
  
  品牌A和品牌D的产物存在明显的非特异性扩增;品牌C的产物大小不正确,完全是非特异性扩增;东盛生物(一款探针法和两款染料法)和品牌B的产物是特异的。
  

  通过对比我们发现,扩增效率不是越高越好,产物特异才是最重要的!

  
  首次使用的引物,不论是进行染料法定量的,还是探针法定量的,都建议通过DNA电泳来直观判断其特异性。当然,染料法定量的特异性也可以借助熔解曲线来判断。
  

  以上只是我们对比测评的一组结果,综合多次、多品牌、多类型的对比结果,从整体水平来看,进口大牌的qPCR预混液比国产品牌质量更可靠,但也不是全部都表现很好。

  东盛生物qPCR Mix不断优化升级,与众多国际品牌对比均表现突出。

  
  东盛生物荧光定量PCR预混液核心成分为类抗体技术修饰的热启动酶,完美平衡了特异性与扩增效率。
  
  特异性过高会抑制扩增效率,扩增效率过高会降低特异性,因此保持特异性和扩增效率在一个平衡的位置是qPCR Mix的技术难题。
  
  东盛生物拥有超过十年的PCR技术研发经验,经过反复尝试,不断优化,得到了兼顾特异性与扩增效率的qPCR Mix。


      朗基Q2000型荧光定量PCR系统  介绍:

相关文章