随着科学技术的不断发展,凝胶成像系统日趋完善,功能越来越多。选择合适的仪器设备是实验成功的保障,但市场上凝胶成像系统品类令人眼花缭乱,应该如何选择呢?这里小编为大家总结了凝胶成像系统的四大采购原则。
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原则1:不选贵的,只选对的
根据实验室研究内容和方向,明确最常应用的成像类型,再根据需求选择某一特定凝胶成像系统。下面就实验室最常见的一些应用简单说明选择的依据:
普通核酸凝胶电泳:一般此类都采用EB染色、紫外激发,而且凝胶较小,推荐采用普通的凝胶成像设备即可。
蛋白凝胶电泳:一般此类凝胶采用考染或银染,白光透射成像。对于小型凝胶您可以选择一般的凝胶成像设备,但是对于大型凝胶,特别是双向电泳凝胶,扫描成像是最好选择。因为CCD拍照成像会有几何扭曲,其透镜效应也会导致不同区域的信号强度差异,另外CCD拍照也无法保证不同凝胶的成像参数保持一致。
化学发光成像: 真正需要花心思考察的可能就是准备做化学发光的用户,他们对敏感度要求高,同时还要求比较宽的动态范围。要想捕获到微弱的化学发光,需要很好的CCD相机和镜头。而化学发光是目前最常用的蛋白印迹检测手段,冷CCD拍照成像对这种微弱的光信号是最合适的。
荧光凝胶成像:荧光是所有这些检测手段中最有前景的技术。这不仅仅是因为荧光染料具有最宽的动态范围,还因为它能够提供多通路的检测途径。若使用单一荧光检测,这时凝胶成像设备的需要考虑到新的激光光源和相应的滤光片;若需要对邻近或重叠的目标分子进行成像,那么多通道荧光检测就是不二之选,这时扫描成像绝对是最佳选择。
原则2:关键参数很重要
大部分成像仪的参数有几十条,但最关键的就几个。对比不同厂商的参数时,需要着重注意关键参数,无关紧要的参数则不要太在意。
分辨率:和像素相关,像素为CCD能分别的最小的感光元件,即为一个点。CCD与像素数量和像素大小也有关。
动态范围值:动态范围表示在一个图像中最亮与最暗的比值。灰阶12(bit)表示在一种表征光亮度的方法 ,动态范围的值越高CCD性能越好。
量子效率:CCD的量子效率也称像素灵敏度,指在一定的曝光量下,像素势阱中所积累的电荷数与入射到像素表面上的光子数之比。
信噪比:化学发光检测的时候,需要曝光的时间比较长,这样导致CCD产生较多的暗电流,对图像的质量影响非常大。需要通过CCD降温来减少影响
光学镜头:光学镜头从焦距上可分为短焦镜头、中焦镜头,长焦镜头;从视场大小分有广角、标准,远摄镜头;结构上分有固定光圈定焦镜头,手动光圈定焦镜头,自动光圈定焦镜头,手动变焦镜头、自动变焦镜头,自动光圈电动变焦镜头,电动三可变(光圈、焦距、聚焦均可变)镜头等。
滤光镜片:要根据具体的激发光源和滤镜来决定。
原则3:仪器操作安全性
安全性是用户考虑的一大问题。由于涉及到EB和各种DNA染料的因素,操作过程会否对操作者本身或者操作环境造成污染,这是需要考量的。
原则4:厂商售后或增值服务
良好的售后,是仪器制造商重要的软实力。你购买的不只是一台仪器,更是这台仪器附加的服务。仪器使用中,难免会因为仪器运行时间久、个人操作不当等出现问题,这时厂家能够提供及时的技术支持或技术指导格外重要。