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原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门技术,主要是利用核酸分子单链之间碱基序列的互补,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或 RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来,可以在细胞标本或组织标本上进行。
荧光原位杂交结果示意图
主要包含以下四种技术:
1.基因组原位杂交技术(GISH)
2.荧光原位杂交技术(FISH)
3.多彩色荧光原位杂交技术(mFISH)
4.原位PCR(In situ PCR)
原位杂交技术的一般过程:
以经过标记的已知核酸分子为探针
以细胞内与探针序列互补的特异核酸分子为靶分子
在一定条件下使探针与靶核酸分子在原位发生杂交
探测
实验过程中关键因素:
杂交液、探针浓度、温度、湿度、pH、时间
应用:
1.细胞特异mRNA转录的定位,用于基因图谱、基因表达和基因组进化的研究
2.感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位
3.癌基因、抑癌基因和各种功能基因在转录水平的表达和变化的检测
4.基因在染色体上的定位和检测染色体的变化
5.间期细胞遗传学的研究
6.疾病的基因变化的研究
TDH-500原位杂交仪
TDH-500原位杂交仪可以根据实验者的设置,自动完成变性和杂交过程。该系统一次可处理12张玻片。全密封式上盖设计和全自动的加湿方法保证了理想的温度和湿度,为实验提供了可靠的保证。玻片很容易用手取出或放入,利用触摸屏可以简单快速的编辑个用户定义方案和4种操作模式:变性/杂交、杂交、自定义模式以及原位PCR实验模式。
产品特点
程序化操作,保证实验结果更准确
1. 一次可进行12张切片的实验,良好的密封性和全自动的加湿方法保证样本的最佳温度和湿度
2. 有99个用户程序和3种操作模式,适合各种原位杂交实验
用户程序设定
1. 变性/杂交、杂交、自定义模式以及原位PCR实验四种操作模式
2. 触摸屏操作,简单易行,显示屏随时显示实验条件,实验过程一目了然
精确的温度控制和湿度控制
1. 快速升降温,温度从37℃升至95℃仅需3分钟,95℃降到45℃仅需7分钟
2. 温度的良好均匀性
3. 优化的温度/湿度控制,系统完美的密封型,即保证了温度控制也保证了湿度控制
技术参数
温度控制范围:室温+5℃-99.9℃
温控精度:±1℃
温度一致性:±1℃
温度显示精度:±0.1℃
时间设置:1min~99h59min 或者 1sec~99 min59sec
加热时间(37℃升至95℃)≤3分钟
冷却时间(95℃降至45℃)≤7分钟
操作模式:变性/杂交、固定温度杂交、原位PCR、自定义
温度设置范围:30℃~100℃
容量:12张载玻片
尺寸(L×W×H):420x225x143mm
重量:5.8kg
功率:400W
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