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原位杂交的4种技术

来源:中国仪器批发网2018-10-12 15:52:18浏览:860

原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门技术,主要是利用核酸分子单链之间碱基序列的互补,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或 RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来,可以在细胞标本或组织标本上进行。

荧光原位杂交结果示意图


主要包含以下四种技术:

1.基因组原位杂交技术(GISH)

2.荧光原位杂交技术(FISH)

3.多彩色荧光原位杂交技术(mFISH)

4.原位PCR(In situ PCR)


原位杂交技术的一般过程:


以经过标记的已知核酸分子为探针

以细胞内与探针序列互补的特异核酸分子为靶分子

在一定条件下使探针与靶核酸分子在原位发生杂交

探测


实验过程中关键因素:

杂交液、探针浓度、温度、湿度、pH、时间


应用:

1.细胞特异mRNA转录的定位,用于基因图谱、基因表达和基因组进化的研究

2.感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位

3.癌基因、抑癌基因和各种功能基因在转录水平的表达和变化的检测

4.基因在染色体上的定位和检测染色体的变化

5.间期细胞遗传学的研究

6.疾病的基因变化的研究


TDH-500原位杂交仪


  TDH-500原位杂交仪可以根据实验者的设置,自动完成变性和杂交过程。该系统一次可处理12张玻片。全密封式上盖设计和全自动的加湿方法保证了理想的温度和湿度,为实验提供了可靠的保证。玻片很容易用手取出或放入,利用触摸屏可以简单快速的编辑个用户定义方案和4种操作模式:变性/杂交、杂交、自定义模式以及原位PCR实验模式。


产品特点

程序化操作,保证实验结果更准确

1. 一次可进行12张切片的实验,良好的密封性和全自动的加湿方法保证样本的最佳温度和湿度

2. 有99个用户程序和3种操作模式,适合各种原位杂交实验


用户程序设定

1. 变性/杂交、杂交、自定义模式以及原位PCR实验四种操作模式

2. 触摸屏操作,简单易行,显示屏随时显示实验条件,实验过程一目了然


精确的温度控制和湿度控制

1. 快速升降温,温度从37℃升至95℃仅需3分钟,95℃降到45℃仅需7分钟

2. 温度的良好均匀性

3. 优化的温度/湿度控制,系统完美的密封型,即保证了温度控制也保证了湿度控制


技术参数

温度控制范围:室温+5℃-99.9℃

温控精度:±1℃

温度一致性:±1℃

温度显示精度:±0.1℃

时间设置:1min~99h59min 或者 1sec~99 min59sec

加热时间(37℃升至95℃)≤3分钟

冷却时间(95℃降至45℃)≤7分钟

操作模式:变性/杂交、固定温度杂交、原位PCR、自定义

温度设置范围:30℃~100℃

容量:12张载玻片

尺寸(L×W×H):420x225x143mm

重量:5.8kg

功率:400W

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