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紫外分光光度计测定样品步骤

来源:中国仪器批发网2018-08-01 11:11:03浏览:731

  紫外分光光度计测定样品步骤?
  
  紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。

      1、首先,知道所需要测量物质的特征吸收波长是多少,这个可在国家标准、行业标准或其他相关标准或方法。例如测量总氮的话,就需要220和275nm这2个波长,所以必须买紫外的光度计,并且尽量带双波长测定功能,例如测总磷是697nm,只需买台可见光度计就可以了。

  
  2、第二步:知道所测量的物质的实验方法,需要哪些仪器和设备,还有玻璃器皿等,同时还有比较完成测量所需要的所有化学试剂等。这个可以在标准或实验方法中找到,基本在互联网上都可以找到电子版的测量方法。
  
  3、第三步:配置好所需测量物质的标准浓度溶液,一般是5~8个标准溶液,浓度建议从高到低,建议每个不同浓度贴上标签,以防顺序搞错。注意,部分实验需要往标准溶液中加显色剂之后才可以用光度计进行测量。
  
  4、第四步:设置好光度计的测量波长,这就需要熟悉光度计的基本操作,一般测量物质的浓度都是用的标准曲线法,就是对应光度计中的定量测量功能。具体操作时第一步,把仪器的波长调整到我们所需要的波长,例如测量总磷直接把波长走到697nm,之后放入装好蒸馏水的比色皿到样品室做空白,就是熟称的调零。第三部把标准溶液放入样品室,依次测量他们的吸光度,仪器一般会自动记录之后就会给出标准曲线方程,实验完毕。如果仪器不能直接记录吸光度,可以先记在笔记本上,之后用excel软件进行计算标准曲线。判断做出的标准曲线是否能用,看哪个R值即那个相关系数,一般最少做出0.999就可以用了,差一点的仪器也可以做出0.99.
  
  5、第五步:把未知样品放入样品室就可以直接测量出样品浓度。

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