实验中PCR的运用

　　PCR仪实际就是一个温控设备，能在95℃，55℃，72℃之间很好地进行温度控制。

　　根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为：普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR，实时荧光定量PCR仪等几类。

　　普通PCR仪：

　　一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，称之为普通PCR仪，也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。

　　普通PCR仪主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。

　　梯度PCR仪：

　　一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。不同的DNA片段其最适合的退火温度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。

　　梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样既节约时间，也节约成本。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。梯度PCR仪多应用于科研、教学机构，检验、检疫等。

　　原位PCR仪：

　　PCR是提取细胞或组织中的DNA进行基因扩增反应，而原位PCR是保持细胞或组织的完整性，使PCR反应体系渗透到组织和细胞中，在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA，而且还可以了解靶DNA存在于何种细胞中，更有利于探讨靶DNA与细胞之间的关系。

　　原位PCR仪，主要应用于：(1)检测外源性基因片段，提高检出率，集中在病毒感染的检查上，如HIV、HPV、HBV、CMV等;(2)观察病原体在体内分布规律(3)内源性基因片段，如人体的单基因病、重组基因、易位的染色体、Ig的mRNA片段、癌基因片段等。(4)检测导入基因;(5)遗传病基因检测如β-地中海贫血。

　　实时荧光定量PCR仪：

　　在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，形成了具有荧光定量功能的PCR仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同，在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记，使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统，得出量化的实时结果输出。

　　荧光定量PCR仪有单通道，双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候，选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物，因为一次只能检测一种目的基因的扩增量，需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR，实现一次检测多种目的基因的功能。

　　普通的PCR仪比荧光定量PCR仪少了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段，而实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的，定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作，反之就可以了，况且这样代价太大了，一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不能互相取代。湿度传感器探头,不锈钢电热管PT100传感器,铸铝加热器,加热圈流体电磁阀 .

　　普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多，而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果，还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病，品种分子标记筛选，甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。

　　但是，某些需要定量的实验就必须用到实时定量PCR了。比如检测某些病原物的数量(血液乙肝病毒复制程度)，特定基因的表达量(比如结合反转录做的RNA定量分析)，某些基因在染色体组中拷贝数(以前往往使用southern blot技术)等等。荧光定量PRC一般不需要对扩增产物进行电泳分析，操作相对简单些，但是耗材实在是贵。

　　基因扩增仪只能扩增，不能检测，便宜。荧光定量PCR仪除了扩增，还能在扩增的同时检测DNA发出的荧光信号，试剂和仪器都更贵。