●凡本网注明“来源:仪器批发网”的所有作品,版权均属于仪器批发网,转载请必须注明仪器批发网,http://www.china17pf.com/,违反者本网将追究相关法律责任。
●本网转载并注明自其它来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
●如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
紫外吸收A280法是利用蛋白中色氨酸和酪氨酸残基在紫外280nm波长处有特征性的吸收峰,并且其光吸收值与蛋白质浓度呈正比来测定蛋白质含量。
然而对于杂蛋白来说,溶液组成复杂,溶液中蛋白吸光系数不同,除此之外溶液中的核酸也会影响蛋白检测的结果,因而当蛋白溶液不纯时,利用比色法进行蛋白定量将是您实验的更佳选择。
一、实验方法
配置一系列浓度BSA蛋白标品,并用紫外吸收法A280与比色法分别检测BSA标品蛋白浓度。
二、检测方法
2.1 紫外吸收法A280定量蛋白浓度(奥盛Nano-500微量分光光度计)
三、检测结果
Nano-500微量分光光度计的比色法检测功能仅需2ul的上样量,仪器便可自动拟合出相应的曲线方程,并可导出保存,方便下次使用。
图1.Nano-500的BCA标准曲线
图2.FlexA-200的BCA标准曲线
由表1可以看出,当检测标品BSA纯蛋白时,紫外A280法与比色法的检测浓度基本无差异。
表1.不同检测方法的蛋白定量结果
综上所述,对于蛋白质标准品而言,A280法和比色法浓度检测结果无明显差异,但若是试剂提取的总蛋白时,结果又会如何呢?详细结果我们将在下次的文章中带来。
●凡本网注明“来源:仪器批发网”的所有作品,版权均属于仪器批发网,转载请必须注明仪器批发网,http://www.china17pf.com/,违反者本网将追究相关法律责任。
●本网转载并注明自其它来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
●如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。