了解基因电转

　　

　　❶ 细胞处理量：1x10⁶-1x10⁷个细胞；　

　　❷ 高转染效率和高细胞存活率：辉园苑自主研发的创新型低电压基因电转仪，即在较低的电压下，可产生足够强度的均匀电场，实现细胞的高转染效率及细胞高存活率；（60%以上电转效率，90%以上存活率）；　

　　❸ 符合GMP标准耗材：在GMP车间，按GMP标准生产与质检；　

　　❹ 专用电转缓冲液：常规的传染试剂，也可用于我们的电转仪，实现电转仪的广谱性使用，配套我们的电转缓冲液，可显著提高细胞转染率及存活率，更好的保护细胞，达到实验的高效率；　

　　❺ 应用领域：科研方向-多基因筛选，功能基因组筛选；　　

　　❻ 合理的设备及耗材成本：相对于脂质体的化学转染和病毒的生物转染，我们转染体系绝对划算，有成本优势。

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      1、转染（transfection）概念

　　
　　真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。
　　
　　2、转染类型
　　
　　常用的细胞转染方法主要分为三类途径：物理介导（电穿孔法，基因枪法、显微注射法）、化学介导（脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物介导法）、生物介导（病毒介导转染、原生质体转染）。
　　
　　01物理介导
　　
　　❶ 电穿孔法：短暂高强度脉冲，介导外源基因导入
　　
　　❷ 基因枪法：粒子轰击法，氦气或氮气通过压缩，冲击细胞，将携带的外源基因轰入细胞内部
　　
　　❸ 显微注射法：管尖极细（0.1至0.5μm）的玻璃微量注射针，将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中
　　
　　02化学介导
　　
　　❶ 脂质体转染法：脂质体类似于细胞膜结构的化学物质，包裹外源DNA，通过膜融合，介导的胞吞作用
　　
　　❷ 磷酸钙共沉淀法：Ca2+离子与DNA可形成复合物沉淀，加入细胞表面，可介导内吞作用进入
　　
　　❸ 阳离子聚合物介导法：阳离子聚合物可与DNA的磷酸根通过静电作用结合形成复合物，介导外源基因进入细胞
　　
　　03生物介导
　　
　　❶ 病毒介导转染：通过病毒为媒介，携带外源基因，感染细胞，介导外源基因插入至基因组的方法（慢病毒，腺病毒，灭活仙台病毒）
　　
　　❷ 原生质体转染：以原生质体为受体细胞,将目的基因导入受体细胞,使之表达
　　
　　3、不同转染类型的优劣势分析
　　
　　
　　因此，瞬转有化学介质的毒性影响，病毒转染，有潜在的安全影响， 有致瘤的风险，选取一种无毒，安全的转染方法是当前也是以后必然的一种趋势和方向，电转染方法应运而生。
　　
　　4、电转染原理及其应用
　　
　　01电转染
　　
　　是通过短暂的高强度电脉冲作用于细胞，当外加电场强度大于细胞膜穿孔的临界强度，细胞膜上就会出现一过性的、可逆的孔道，外源大分子如ＤＮＡ、蛋白或抗体等以弥散的方式通过这些孔道直接进入细胞内，或伴随孔道关闭时细胞膜结构重塑以吞饮的方式进入细胞内。
　　
　　
　　02电转原理
　　
　　❶ 细胞膜近似绝缘体，细胞附近电转液中电流扭曲；
　　
　　❷ 在串联电路中电阻越大分到电压越大，细胞两端电压基本都落在两端细胞膜上
　　
　　只有一个细胞端面电转有效；
　　
　　❸ 细胞质内分到电压很小，DNA电转进入细胞膜后马上停止，后续靠细胞本身机制慢速扩散；
　　
　　❹ 细胞核两端电压及其微小，微小的电压又落在核膜上，核内部完全没有电压，电转没有基因毒性。
　　
　　
　　03电转染的应用
　　
　　电脉冲疗法具有广阔的前景，它是指在电脉冲的作用下，细胞膜的通透性发生改变，细胞产生可逆性或不可逆性电穿孔，利用这种穿孔，导入那些在正常情况下不易通过细胞膜的药物、疫苗、DNA、RNA 及寡核苷酸等物质，或直接使肿瘤细胞发生不可逆性电穿孔而破裂死亡，从而达到治疗目的。
　　
　　❶ 电化学疗法：利用高强度的电脉冲引起细胞膜结构改变，使原本不易透过脂质双分子层膜的化疗药物易进入细胞内，将电脉冲与化疗药物相结合治疗肿瘤，可以增强化疗药物对肿瘤细胞的毒性作用，降低化疗药物的全身使用剂量，克服化疗耐药性和肿瘤治疗后再生的问题；
　　
　　❷ 电转基因疗法：将电脉冲和基因治疗结合起来，利用电脉冲所致的可逆性穿孔导入 DNA 或 RNA 疫苗，通过 DNA 或 RNA的表达抑制肿瘤的发展，亦称电基因疗法；
　　
　　❸ 不可逆性电穿孔：随着电脉冲剂量的增加，细胞膜出现不可恢复的破裂即不可逆性电击穿（irreversible electroporation，IREP）而导致细胞死亡
　　
　　❹ 细胞内电处理疗法；
　　
　　❺ 细胞电融合技术的应用；
　　
　　❻ 蛋白分子电嵌入细胞膜的研究。
　　
　　5、电转解决的问题
　　
　　01适用于难转染细胞类型
　　
　　干细胞、原代细胞、神经细胞、不分化细胞、部分难转染肿瘤细胞。
　　
　　02缩短实验周期
　　
　　电转染方法相较于脂质体和病毒转染，大大缩短转染周期，可快速的获取得到实验结果，加快科研进程。
　　
　　03操作简单
　　
　　电转染方法操作简单，易上手。
　　
　　04生物安全性更高
　　
　　对于科研与临床结合试验来说，脂质体转染有化学毒性，对细胞影响较大，死亡量较高，生物病毒型感染，有潜在的致瘤风险，而物理的电转染法，既可保证转染效率，又可保证生物安全性，成为新一代机具潜力的转染技术应用。
　　
　　05多体系转染
　　
　　现阶段研究，多以单基因，寻找明星分子或筛选（测序）获取得到研究的靶标分子，针对单个因素，研究生理生化及其转化转归，作用机制，代谢路径，作用方式等方面，而电转不局限于单个基因的研究，可多体系，多质粒，多功能基因组层次筛选与转染，提高科研层次，开拓科研广度，加大科研深度。