定量PCR来帮忙“非洲猪瘟病毒”

　　2018年8月，对于养殖户来说，突如其来的“非洲猪瘟”让他们措手不及。从8月3日辽宁沈阳确诊第一例开始，截止目前，非洲猪瘟已经蔓延到12个省份的31个地市，几乎全国都出现了非洲猪瘟。
　　
　　为了防止传染病的蔓延，最关键就是第一步的及早确诊。目前对于非洲猪瘟这种传染性病毒有以下几种诊断方法：
　　
　　(1)红细胞吸附试验
　　
　　(2)直接免疫荧光试验
　　
　　(3)动物接种试验
　　
　　(4)间接免疫荧光试验
　　
　　(5)酶联免疫吸附试验
　　
　　(6)免疫电泳试验
　　
　　(7)间接酶联免疫蚀斑试验
　　
　　显而易见，相比基于PCR技术的分子诊断方法，以上这些技术均存在耗时长、操作繁琐的缺点，其中最长耗时长达10天以上，极不利于对猪瘟爆发阶段的快速响应。
　　
　　除此之外，出于环保的考虑，养殖场一般会建在比较偏远的地区，当地可能不具备现场诊断条件（缺少专用的仪器设备、检测人员匮乏、病毒检测安全要求不达标等）。潜在病毒感染动物的样本只能经长途运输后送到疾控中心，样本运送中还要维持冷链，一方面单个样本的检测成本大大提高，另一方面耗费时间长，不利于快速地防控疫情。
　　
　　众所周知，管控疫情最大的要求就是快、准、狠。快和准是指检测结果，一旦发现疫情，只能狠下决心进行扑杀。而目前能达到既快又准的检测要求，唯有实时荧光定量PCR技术，这是目前用于检测各类传染性病原菌和病毒最有效的设备，它具有检测灵敏度高，特异性好的优点。检测过程无需开盖，大大降低了人畜共患病可能对操作人员带来的潜在危害。
　　

　　这里小编隆重介绍杭州朗基生产的Q1000型荧光定量PCR系统，由于采用T-Optical顶部检测技术，可以使用白管，相比国内大多数采用底部或侧面检测技术而只能使用透明管的同类产品，出峰时间更短，检测灵敏度也更高（下图为国外厂家测试的白管跟透管的检测效果比较）。

　　

　　高瘦美的Q1000除了颜值开挂外，还具有令人羡慕的升降温速度，固定光学检测部件更稳定、更可靠、更耐用，还自带7”触控屏。48个样品孔完全适合中高通量的样本检测。

　　

　　分析软件内置阴阳性判定功能，一次可以检测48个样本的阴阳性。同时软件支持添加IPC（内部阳性对照），通过在待检样本中添加IPC，可以轻松地排除假阴性的干扰，减少误判（见下图）。

　　

　　如果用户一次检测的样本量不多，并且需要快速得出结果，朗基科仪的便携式荧光定量PCR仪——Q160型就是最佳选择。

Q160型便携式荧光定量PCR仪

　　Q160可同时检测16个样品，特别适合疫情爆发的现场检测需要，因为：
　　
　　(1) 所有的操作均可通过自带7”触控屏完成，无需外联电脑（可以省下一台笔记本电脑的银子，此处应有掌声）。
　　
　　(2) 检测速度快，定量PCR试剂和等温试剂开放。若使用定量PCR试剂最短可在40分钟以内出结果。搭配等温试剂时，可在20分钟内完成检测。
　　

　　(3) 灵敏度高，最低可以检测到1个病毒分子。

　　(4) 软件直接给出直观的阴阳性判定结果，使用者无需去考虑复杂的软件操作和参数设置，非常容易上手。同时软件自动判定也避免人工判定带来的误判。

　　(5)最大反应体积100ul，有利于检出极低浓度的病毒存在。

　　
　　(6)同一种病毒存在多种不同基因型的毒株，不同毒株的感染性不同，因而需要防控响应的等级也不同。不同病毒毒株的差异，可借助仪器的熔点峰位置自动判断功能加以初步区分，更有利于对疫情做出针对性的防控。同时该功能还可以用来发现可能的新种变异毒株。
　　(7) 结构轻巧，便于携带，只有3.6公斤，外接移动电源还可进行户外工作。
　　
　　面对来势汹汹的非洲猪瘟，我们应做好充分的准备，用高科技的手段让一切危害食品安全的病毒无所遁形。让国人多一份安心，少一分危险。
　　
　　* 94℃预变性30秒；35次循环（94℃变性3秒，60℃退火/延伸20秒）条件下40分钟可完成实验。具体检测时间受所用试剂及程序的影响。病毒浓度越高，检测时间会越短。

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