如何选购适合自己的荧光定量PCR仪

　　1、仪器的检测通量
　　
　　在购买定量PCR仪的时候要根据实验实的需要来选择不同通量的仪器。目前市面上的荧光定量PCR的检测通量小到16个多到384个。如果进行一般的基因表达研究或病原体检测，实在不必购买昂贵的仪器，96孔的通量足够用；需要寻找要新药靶点和疾病标记的实验室可以考虑购买384孔板的仪器。假如经费有限无法购买384孔板仪器的实验室，可以考虑购买运行速度快（带有FAST模块）的96孔板荧光定量PCR仪。
　　
　　2、硬件设计特点
　　
　　荧光定量PCR仪主要有传统的96孔板式、创新的离心式等，每种设计都有它的独到之处但也都有无法避免的缺憾。
　　
　　传统的96孔板的荧光定量PCR可以容纳的样本量大，而且无需特殊的耗材。有些传统的96孔板的仪器采用卤钨灯激发、CCD检测，这些光学结构在96孔板的顶部，每个样品孔距光源和检测器的光程各不相同——边缘效应，对结果产生影响。为了保证精确、准确的实验结果，这类仪器在实验过程中通常会使用ROX（一种荧光染料）或专用的Reference dye作为参照校正实验结果。卤钨灯的使用寿命短、更换成本较高已经成为很多用户头痛的问题。在实验过程中卤钨灯作为一种热光源，产生较多热能对实验结果有一定的影响。CCD最大的优点就是可以同时扫描所有样品中的荧光信号，但是灵敏度较低，而且同时检测样品间的荧光信号存在干扰。像ABI、Bio-rad 公司生产的荧光定量PCR就属于这一种。但Bio-rad的IQ系列荧光定量PCR带有梯度功能。
　　
　　创新的离心式的仪器通常选用LED激发、PMT检测，离心式的设计上避免了边缘效应。LED光源是冷光源对实验没有影响，因此无需采用其他荧光染料校正仪器，而且使用寿命长无需经常更换。PMT每次只能收集单个荧光信号，但是检测灵敏度高。但这类仪器运行速度非常快，但也存在样本量小、耗材昂贵、没有梯度功能、存在时间积分等缺点。Corbett 的Rotor-gene系列和Roche 的Lightcycler系列均为这一类仪器。
　　
　　随着荧光定量PCR技术的使用，聪明的仪器生产商纷纷在传统的96孔板仪器上大作改进。首先是Stratagene的Mx3000p在检测上突破了使用CCD改用PMT检测荧光信号，大大提高了实验的灵敏度，但激发光源仍然沿用传统的卤钨灯并且没有梯度功能。Eppendorf 公司推出的Mastercycler ep realplex是一款带有梯度功能的荧光定量PCR仪，使用了96个LED为激发光源，采用先进的CPM（第二代PMT）及96合一光纤为检测系统，不但避免了边缘效应还保证所有样品间的荧光信号没有干扰。
　　
　　3、运行速度
　　
　　在荧光定量PCR仪的众多技术参数中，升降温速度也是厂家喜欢大力宣传的指标。更快的升降温，可以缩短反应进行的时间，而且缩短了可能的非特异性结合、反应的时间，提高PCR的特异性。为了更好的完成实验，各个厂家纷纷推出能快速运行的荧光定量PCR仪。例如ROCHE推出的Lightcycler2.0利用空气动力学原理，可在半小时左右完成30-40个循环。ABI的7500可以选配FAST模块拥有5°C/秒的升降温速度，可在40分钟左右完成30-40个循环。最近eppendorf新推出的Mastercycler ep realplex4S 和2S的银质模块荧光定量PCR仪 ，升降温的速度可达到6℃/秒和4.5/秒，是目前同类产品中升降温速度最快的荧光定量PCR 仪。一个在其他仪器上原本需要40—60分钟的PCR反应，eppendorf Mastercycler ep realplex4S 和2S (银质模块)只需运行28分钟——别小看这节约下来的几十分钟，一天下来就可以多运行好几轮了。
　　
　　4、灵活性
　　
　　大规模繁忙的实验室设备固然让人羡慕，但是常规实验室同样可以有精彩的选择。现在的仪器供应商拥有众多技术专家，有的还能提供整个分子生物学的基础研究平台，不但了解、满足您现在的需求，而且还考虑到了你可能变化的需求——升级和更换模块。Bio-rad的Mycycler就可以选择模块升级为定量PCR仪。ABI的7900可以选择将96孔槽变为384孔槽。像离心式的双通道的Rotor-gene3000A
　　

　　就可以根据您研究的需要升级成四通道的荧光定量PCR仪。Eppendorf公司在这方面考虑的就更加周全，如实验室已经拥有Mastercycler ep可以按照您的要求升级为Mastercycler ep realplex荧光定量PCR仪，而且可升级的型号有4种：2通道银质、铝制模块和4通道银质、铝制模块。

     国产荧光定量PCR仪的话，小编也推荐一下杭州朗基Q1000荧光定量PCR！

    Q1000是一款专业精巧的荧光定量PCR系统。它采用先进的顶部进光和顶部检测技术，因而可以使用白色管来增强荧光检测的灵敏度和一致性，保证更佳的实验效果。光学部分完全摆脱了运动部件带来的不稳定性和寿命问题，长期来看大大降低了用户的使用和维护成本。另外，独特的抽屉式样品台设计，使得用户拿取样品更便捷。

　　Q1000 荧光定量PCR系统
　　
　　仪器性能
　　
　　样品台规格：48孔×0.1 ml
　　
　　样品容量：10-50ul （推荐20ul）
　　
　　适用管型：适合白色或透明0.1 ml低位PCR管、0.1 ml低位8联管，光学平盖
　　
　　升降温技术：最新一代半导体热泵技术，循环次数一百万次
　　
　　操控方式：PC机软件控制或通过仪器自带的TFT彩色液晶显示触摸屏控制
　　
　　通讯接口：以太网或USB接口，支持U盘导出数据
　　
　　样品台温度范围：4~100℃
　　
　　温度性能
　　
　　最大升温速率：7℃/sec
　　
　　最大降温速率：5℃/sec
　　
　　样品台温度均匀性：±0.25℃（样品台90℃时）
　　
　　样品台温度准确性：±0.25℃（样品台温度达到90℃并稳定10秒后）
　　
　　温度显示分辨率：0.1℃
　　
　　热盖温度：30℃~112℃可调
　　
　　控温方式：样品台、模拟管模式
　　
　　荧光检测性能
　　
　　光源：长寿命LED
　　
　　检测器：高灵敏度微光探测器
　　
　　检测的荧光素基染料：通道1：FAM、SYBR；通道2：VIC、HEX、JOE
　　
　　荧光激发波长：470-500nm
　　
　　荧光检测波长：通道1：520-540nm；通道2：540-700nm
　　
　　数据导出格式：Excel、TXT
　　
　　其他性能
　　
　　电压范围：全球通电源85-265 VAC，50-60 Hz
　　
　　最大功率：400 W
　　
　　重量：8.2 kg（15.9 lb）
　　
　　尺寸（长×宽×高）：320×205×380mm
　　
　　电脑要求
　　
　　操作系统：Windows 7，Windows 8，Windows 10
　　
　　处理器速度：2.0 GHz
　　
　　显示器分辨率：1366×768
　　
　　内存：4.0 GB RAM
　　
　　可用磁盘空间：＞20 GB